背景:
IdeS是仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。Rhinogen® IdeS protease是利用E.coli系统重组表达生产,并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白。其含有His标签,在酶切完成后很容易从酶切反应体系中分离去除。IdeS蛋白酶在生理条件下切割IgG,从而保持免疫反应性。在pH 6.0~8.0范围的常用缓冲液中,IdeS蛋白酶可有效切割多种抗体。经过改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更广的底物特异性,除可酶切人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外,还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。
包装规格:
Rhinogen® IdeS protease包装规格如下:
目录号 |
规格 |
QIP-001-A |
5000U |
QIP-001-B |
5×5000U |
QIP-001-C |
1000U |
产品来源:
Rhinogen® IdeS protease是利用E. coli表达系统重组表达生产并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白酶,分子量大小约为36kDa。
产品质量:
SDS-PAGE分析,纯度≥95%。
产品特性:
最适pH为6.0~8.0。
酶活定义:
1个酶活力单位定义:37°C条件下,30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需要的酶量。
储存条件:
1. 采用冰袋或干冰运输, 收到产品后请立即将其置于-30℃至 -10℃冻存;
2. 使用前,用无菌水溶解IdeS protease冻干粉末。溶解后,2~8℃存放,若无菌取用,有效期为30天。
产品特点:
Rhinogen® IdeS protease是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶,具有稳定性高、比活性高等特点。适用于重组抗体药物的结构表征分析。
1. 高比活性:有效切割抗体下铰链,获得F(ab’)2和Fc片段;
2. 广泛的底物特异性:除对人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有酶切活力外,还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性;
3. 无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料;
4. 高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性。
应用:
特定位点裂解IgG以产生F(ab’)2和Fc片段。
使用建议:
1、试剂准备:
1) 使用前,请将Rhinogen® IdeS protease取出,10000rpm离心10秒,确保所有干粉都在管底;
2)用去离子水将Rhinogen® IdeS protease干粉溶解成50units/μl溶液。
2、推荐使用方法:
1)在消化缓冲液或其他相容缓冲液中加入所需量的IgG(0.5~10mg/ml);
2)将Rhinogen® IdeS protease加入至IgG样品中;
注意:每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶进行消化;例如,加入1μl(50 units)IdeS溶液以消化50μg的IgG;
3)在37℃条件下孵育30~60分钟。
操作说明:
Rhinogen® IdeS protease能有效地切割人类,人源化,嵌合,羊,兔和猴IgG,并对小鼠IgG2a和IgG3具有较高活性。Rhinogen® IdeS protease也能切割许多Fc-融合蛋白以及抗体药物偶联物(antibody drug conjugates ,ADCs);
1. IdeS protease不能切割小鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,猪,牛或山羊IgG。此外,它不能切割非IgG同种型,包括IgA,IgM,IgD和IgE;