背景:
羧肽酶B又称为肽酰-L-赖氨酸(L-精氨酸)水解酶,属于金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,每分子含有一个Zn原子,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的精氨酸和赖氨酸。活性受精氨酸、赖氨酸的竞争性抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
Rhinogen® Carboxypeptidase B与大鼠胰腺羧肽酶B氨基酸序列完全一致,经过大肠杆菌系统重组表达生产并经过层析纯化得到的重组羧肽酶B。分子量为33.8kD,等电点为6.0,最适pH为7.0-9.0。在25℃-37℃范围下具有较好的酶切活性,在低温下适当延长反应时间也可以进行消化。
产品来源:
Rhinogen® Carboxypeptidase B是利用重组E. coli表达系统表达来源于大鼠胰腺的重组羧肽酶B,经过层析纯化得到的重组羧肽酶B,分子量大小约为33.8kDa。
包装规格:
Rhinogen® Carboxypeptidase B 包装规格如下:
QIP-006是以冻干粉形式提供。
目录号
规格
QIP-006-A
1mg
QIP-006-B
5×1mg
产品质量:
纯度:SDS-PAGE单一主条带,HPLC≥95%。
产品特性:
最适pH为7.0-9.0。
储存条件:
1. 冻干粉采用冰袋运输, 收到产品后请立即将其置于-20℃储存,24个月稳定;
2. 使用前用无菌水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解Carboxypeptidase B冻干粉末,使酶液浓度为1-10mg/ml。溶解后,-20℃存放,避免反复冻融。
产品特点:
Rhinogen® Carboxypeptidase B是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶,具有稳定性高、比活性高等特点。适用于蛋白质C端j碱性氨基酸测定和抗体碱性峰的检测。
1. 高纯度:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求,纯度≥95%;
2. 无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料;
3. 高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性;
4. 冻干粉:易于储存和运输;
应 用:
1.蛋白质C-末端碱性氨基酸如精氨酸、赖氨酸和组氨酸的测定;
2.重组胰岛素及其类似物的生产;
3.重组抗体的质量检测;
4.其它重组多肽类物质的生产;
5.某些特殊化合物的酶促合成。
使用建议:
1、试剂准备:
1)使用前,请将Rhinogen® Carboxypeptidase B取出,10000rpm离心10秒,确保所有干粉都在管底;用去离子水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解冻干粉末,使酶液浓度为1-10mg/ml。
2、推荐使用方法:
2、Carboxypeptidase B蛋白的推荐使用量为,酶量:目的蛋白(质量比)=1:50~1:1000(w/w),最适pH为7.5-9.0,25℃-37℃酶切。
注意:
1)对于不同的蛋白样品,需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间。
2)25℃-37℃反应,使用25℃消化时可以适当延长反应时间。
3)最适的酶切反应缓冲液pH为7.5-9.0,pH≥12时,活性则完全丧失。
操作说明:
本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。