背景:
O- 糖蛋白酶是一组种类不断增加的高度特异性的内切蛋白酶,可识别并切割糖肽/糖蛋白上,与 O- 糖基化丝氨酸或苏氨酸相邻的位置。对 O- 糖蛋白酶酶切产生的糖肽进行 MS 分析,可提供有关蛋白序列中 O- 糖基化位点和每个糖基化位点上连接的 O- 糖链结构的重要信息。
概述:
Rhinogen® O-GlyCORTAR protease 重组表达在大肠杆菌中,含有His 标签,理论分子量约为97kDa。Rhinogen® O-GlyCORTAR protease 是一种依赖于 O- 聚糖的蛋白酶,可消化携带粘蛋白型 O- 聚糖的蛋白质,包括唾液酸化底物、糖基化 Ser 和 Thr 残基的 N 末端。该酶不会消化未端修饰的丝氨酸或苏氨酸残基,也不会消化糖蛋白的 N- 糖基化位点;并且可消化多种 O- 聚糖结构,包括唾液酸化的糖基化核心 1 和核心 2 结构以及 Tn 抗原。
包装规格:
Rhinogen® O-GlyCORTARprotease包装规格如下:
目录号 |
规格 |
QIP-013-A |
2000U/50μl |
酶活定义:
在50mM Tris-HCl,150mM NaCl,pH为7.6条件下,37℃反应30分钟,1单位酶(1U)可消化30µg依那西普 ≥ 95%,通过SDS-PAGE确认。
储存条件:
采用冰袋运输,收到产品后请置于2~8℃保存,请勿冻存。
产品特性:
1. 高纯度:SDS-PAGE 分析,纯度≥ 90%;
2. 高特异性:只能消化携带粘蛋白型 O- 聚糖的蛋白质,包括唾液酸化底物、糖基化 Ser 和 Thr 残基的N末端;
3. 适用性广:接受多种 O- 聚糖结构,包括唾液酸化的糖基化核心 1 和核心 2 结构以及 Tn 抗原;
4. 无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
产品应用:
1. O-糖基化分析;
2. O-聚糖位点测定。
抗体消化:
1. 按1U Rhinogen® O-GlyCORTAR protease /1μg糖蛋白的比例进行消化;
2. 在50mM Tris-HCl,150mM NaCl,pH为7.6,37℃条件下反应2小时。
使用注意事项:
1. 对于复杂的底物,孵育时间可延长至过夜,根据具体情况进行优化;
2. 反应体系中适宜的糖蛋白最终浓度为0.1-10 mg/ml;
3. 本产品仅供研究使用,不适用于人或动的物诊断及治疗用途。