背景：

       抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）是免疫系统对抗病毒感染及肿瘤疾病的一种重要免疫防御机制。抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合，招募如自然杀伤（Natural killer, NK）细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白，是一种抗体Fc区域的受体，能识别并结合抗体的Fc端，从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合，NK细胞就会释放细胞因子和细胞毒性颗粒，进入靶细胞触发细胞凋亡。传统的ADCC检测方法是利用外周血单核细胞（Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）或者从其中分离得到NK细胞作为效应细胞进行检测，该方法的效应细胞较难获取，且方法变异性大、操作繁琐。

       Rhinogen^®ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (BT474) 报告基因检测系统包含抗Her2抗体ADCC功能检测所需的靶细胞BT474细胞及抗Her2抗体对照品。如果您的待测抗体能识别BT474细胞上的不同表面抗原，该试剂盒仍旧适用于您抗体的ADCC活性检测。

       Rhinogen^®ADCC Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，用于检测抗体的ADCC生物学活性。其作用机理基于NFAT（Nuclear factor of activated T-cells）反应通路（图1）。本系统采用基因工程改造的Jurkat细胞作为效应细胞，该细胞稳定表达FcγRIIIa受体（V158高亲和力突变体）和由NFAT应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。抗体通过与效应细胞表面FcγRIIIa的结合，激发细胞内NFAT反应元件，NFAT反应元件则驱动萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶活性通过生物发光进行定量。

图1.Rhinogen^® ADCC Reporter Bioassay原理图

产品规格:

特点：

       Rhinogen^®ADCC报告基因检测系统提供的ADCC生物学活性检测方法操作具有操作简便（图2）、变异性低、灵敏度高等特点，并可与多种不同的靶细胞搭配使用。

       1. 原理明确：基于抗体结合细胞对效应细胞FcγRIIIa受体信号通路的激活；

       2. 应用广泛：治疗性抗体药物的Fc功能学研究和产品质控、ADCC作用机制研究；

       3. 操作简便：检测过程简单，检测试剂易用；

       4. 适用性广：该系统已完成针对悬浮或贴壁的多种靶细胞的适用性验证，效果良好；

       5. 灵敏度高：可灵敏的检测到抗体糖型的改变；

       6. 稳定性好：传代30次仍可稳定灵敏检测，数据重复性好。

       Rhinogen^®ADCC报告基因检测系统的各项特性使得其可作为抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时，该法可作为抗体药物ADCC活性的常规检测方法及批签发检测指标。

图2. Rhinogen^® ADCC Reporter Bioassay检测流程图

运输及存储：

       运输方式：干冰运输

       储       存：收到细胞后，请立即将ADCC Bioassay效应细胞及BT474靶细胞冻存管转移至-140°C以下的保存条件长期保存。抗Her2抗体请保存在-20℃。