背景:
抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)是免疫系统对抗病毒感染及肿瘤疾病的一种重要免疫防御机制。抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合,招募如自然杀伤(Natural killer, NK)细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白,是一种抗体Fc区域的受体,能识别并结合抗体的Fc端,从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合,NK细胞就会释放细胞因子和细胞毒性颗粒,进入靶细胞触发细胞凋亡。传统的ADCC检测方法是利用外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)或者从其中分离得到NK细胞作为效应细胞进行检测,该方法的效应细胞较难获取,且方法变异性大、操作繁琐。
Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法,用于检测抗体的ADCC生物学活性。其作用机理基于NFAT(Nuclear factor of activated T-cells)反应通路(图NFAT应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。抗体通过与效应细胞表面FcγRIIIa的结合,激发细胞内NFAT反应元件,NFAT反应元件则驱动萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶活性通过生物发光进行定量。
图1.Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay原理图
包装规格:
目录号 | 规格 |
RA-CK01 |
1×1ml |
特点:
Rhinogen® ADCC报告基因检测系统提供的ADCC生物学活性检测方法操作具有操作简便(图2)、变异性低、灵敏度高等特点,并可与多种不同的靶细胞搭配使用。
1. 原理明确:基于抗体结合细胞对效应细胞FcγRIIIa受体信号通路的激活
2. 应用广泛:治疗性抗体药物的Fc功能学研究和产品质控、ADCC作用机制研究
3. 操作简便:检测过程简单,检测试剂易用
4. 适用性广:该系统已完成针对悬浮或贴壁的多种靶细胞的适用性验证,效果良好
5. 灵敏度高:可灵敏的检测到抗体糖型的改变
6. 稳定性好:传代30次仍可稳定灵敏检测,数据重复性好
Rhinogen® ADCC报告基因检测系统的各项特性使得其可作为抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时,该法可作为抗体药物ADCC活性的常规检测方法及批签发检测指标。
图2.Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay检测流程图
运输及储存:
运输方式:干冰运输
储 存:收到细胞后,请立即将ADCC Bioassay 效应细胞冻存管转移至-140°C以下的保存条件长期保存。